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双重荧光素酶报告基因优点是具有灵敏度高，缺点是需要多次实验。双荧光素酶报告基因检测系统因其具有灵敏度高、无细胞内源性表达干扰等优势，现已被广泛用于基因表达调控的研究中，同批次样品检测值也可能出现浮动。所以实验一般需要做3个或3个以上复孔，并且引入另一个报告基因作为内参。双荧光素酶报告基因检测是以荧光素为底物来检测萤火蛟光素酶活性的一种报告系统。
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