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先天性弓形体病的实验室检查及辅助检查

2023.3.11
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  实验室检查:

  (一)病原体检查 可取各种体液如脑脊液、痰液、胸腹水、骨髓等涂片,淋巴结印片及组织切片,用常规染色法或免疫细胞化学法检测,可发现弓形虫滋养体或包囊;也可将上述标本接种小鼠或组织培养法分离弓形虫;近年来用核酸原位杂交或聚合酶反应(PCR)检测弓形虫DNA,可能有助弓形虫感染的诊断。特别是应用PCR检测脑脊液和羊水中弓形虫DNA,分别对脑弓形虫病和先天性弓形体病的诊断有较大意义。

  (二)免疫学检查

  1.以完整虫体为抗原来检测血清中的抗虫体表膜的抗体常用方法有:①Sabin—Fcldman染色试验(SFDT);②直接凝集试验(DAT);③间接荧光抗体试验(IFA)。

  2.检测主要针对虫体胞浆成份的抗体,常用方法有:①间接血凝试验(IHA);②双夹心ELISA法检测特异性1gM(DS—1gM—ELISA;③双夹心ELISA检测特异性1gA(DS—1gA—ELISA);④补体结合试验(CF)。

  3.应用抗弓形虫特异性抗体检测血清或体液中的弓形虫循环抗原(CAg)是近年广泛应用的技术。弓形虫循环抗原阳性是病原体存在的指标,可诊断人弓形虫急性感染。(三)其他患者末梢血象,白细胞数可呈正常或轻度上升,其中淋巴细胞数和嗜酸粒细胞数可稍增高,可见异常淋巴细胞。弓形虫脑膜炎患者脑脊液压力多呈正常,外观黄色,球蛋白试验多呈阳性,细胞数稍增多,一般(100—300)×106/L,主要为单核细胞,葡萄糖含量正常或下降,蛋白含量增高,氯化物多正常。诊断应综合临床表现,病原学和免疫学检查进行诊断。对先天性畸形或艾滋病患者出现脑炎者,均应考虑本病的可能性,确诊须有病原学或血清学证实。

  辅助检查:

  1.亚甲蓝染色试验 在感染早期(10~14天)即开始阳性,第3~5周效价可达高峰,可维持数月至数年。低效介一般可代表慢性或过去的感染。从母体得来的抗体,在生后3~6个月内消失。因此小儿满4个月后,可重复染色测定抗体,如效价仍维持高度,就可证明由于感染。

  2.间接免疫荧光试验 所测抗体是抗弓形虫IgG ,其出现反应及持续时间与亚甲蓝染色试验相仿。

  3.IgM-免疫荧光试验 是改良的间接免疫荧光试验,感染5~6天即出现阳性结果,可持续3~6月,适于早期诊断。由于IgM的分子量大,母亲的IgM一般不能通过胎盘传给胎儿,如新生儿血清中含有抗弓形虫IgM,则可考虑先天性弓形虫病的诊断。

  4.直接凝集反应 主要用于测抗弓形虫IgM,以1∶16凝集作为阳性,感染后5~6天则能测得阳性。

  5.酶联免疫试验和可溶性抗原-荧肖抗体技术 操作简便、快速,前者并可适用于大规模普查,其敏感性和特异性均较满意,后者只要一次稀释就能没出抗体水平,其敏感性与免疫荧光反应相仿。

  有的国家把血清学检查列入法定婚前必查项目。如在法国巴黎(1985),曾为20~26周孕妇的胎儿血作病原学和血清学检查,阳性者作人工流产。

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