实验原理 1、(色素提取原理:色素溶于有机溶剂而不溶于水，可用95%的乙醇、丙酮等有机溶剂来溶解色 素，从而提取绿叶中的色素。色素提取也可用水浴加热法，即把叶片剪碎后放在95%的乙醇 中，进行隔水加热来提取。一般地说，叶片加热到变成黄白色，叶片中的色素基本上被提取出 来了。2、(色素分离原理:各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散速度比 较快，反之则比较慢，从而使各种色素相互分离开来。
二、实验中几种化学药品的作用
95%的乙醇 ：溶解色素，提取色素；
层析液 ：分离绿叶中的色素 ；
二氧化硅 ：增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构，使研磨充分 ；
碳酸钙 ：防止研磨过程中色素被破坏。
三、实验流程
（1）提取绿叶中的色素——研磨法
称取、剪碎5g叶片，放入研钵中。加入少许二氧化硅、碳酸钙、5mL丙酮。快速、充分研磨。
根据叶绿体中的色素在有机溶剂（乙醇、丙酮等）中溶解的特性，用丙酮可将色素从叶片中提取出来（若用95％的酒精作溶剂，则应向色素提取液中加入无水碳酸钠，除去色素提取液中的水分。若用丙酮作溶剂，则用量不宜过多，以2～5mL为宜，过多会影响色素浓度，过少不易过滤），过滤后收集滤液（将研磨液迅速倒入基部已放—块单层尼龙布的漏斗中过滤），将滤液收集到小试管中，及时用棉塞将试管塞紧备用。注：也可以不过滤，加入适量的丙酮把叶子研磨成糊糊状，再用载玻片（或木工用的竹笔）的一端蘸取研磨液直接点样即可。
（2）制备滤纸条
将干燥过的定性滤纸剪成6 cm×l cm的条，一端剪去两角，距该端lcm处用铅笔画一条极细的横线。用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线，待干燥后再重复画2～3次（次数越多色素越多）。
（3）色素分离------纸层析法
将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许 （2～3mL）层析液的烧杯中，盖上培养皿。
（4）观察层析后，取出滤纸条，烘干后观察色素分离情况。
（5）整理、洗手。
四、实验结果及分析
1、从色素带的宽度可推知色素含量的多少依次为:叶绿素a,叶绿素b,叶黄素,胡萝卜素。
2、从色素带的位置可推知色素在层析液中的溶解度大小依次为:胡萝卜素,叶黄素,叶绿素a, 叶绿素b。
五、实验中的注意事项
1、选材: 选取鲜嫩深绿的叶片，以保证含有较多的色素。
2、提取色素:研磨要迅速、充分，以保证提取较多的色素。
3、点样:用力要均匀，快慢要适中。滤液细线要细、直，且干燥后重复画3~4次，使滤液细线既 有较多的色素，又使各色素扩散的起点相同。
4、色素分离:滤纸上的滤液细线要高于层析液液面，不要触及层析液，以防色素溶解到层析液中，滤纸条上得不到色素带。
5、实验安全:本实验需接触层析液等有害物质，实验结束后一定要用肥皂将手洗净。
六、实验成功的关键
1、选取的叶片要新鲜、颜色要深绿，以保证含有较多的色素。
2、研磨要迅速、充分。叶绿素不稳定，易被活细胞内的叶绿素酶水解，因此要加碳酸钙，以防止色素被破坏。乙醇容易挥发，所以研磨要迅速。充分研磨使叶绿体完全破裂，从而提取较多 的色素。
3、滤液细线不仅要求细、直，而且要求含有较多的色素，所以要求待滤液干后再画2~3次。
4、滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，滤纸条上得不到色素带。
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