关于黏性质粒载体的简介

　　由于真核基因的结构与功能研究的需要，人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors，cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写)，也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位点(体外包装所必需)的细菌质粒。黏粒DNA和外源DNA经酶切后，需在较高浓度下连接，使两个cos位点之间有一个完整的质粒序列。当体外包装时，带有外源DNA的重组黏粒在cos位点上被切开，包装成为成熟的噬菌体颗粒。这样，噬菌体颗粒在感染菌体内重组DNA通过噬菌体的黏端而环化，并可以在宿主内自我复制，表达抗性标记。例如采用黏粒C2RB进行克隆时，首先在插入位点和两个C08基因之间切开载体，插入外源DNA，由于在两cos基因之间有一个完整的质粒序列，在体外包装成为病毒颗粒后可感染大肠杆菌，根据其抗药标志选择转化子菌落。

　　常用的黏粒主要有pHC79、pJB8、MUA一3、pKU206和KOSI等，它们大多具有一种或多种限制性内切酶的单一酶切位点。pUC118与pUC119是一对相同序列的载体，但是多克隆位点区的方向相反，使外源DNA可以以正、反方向插入，它们由M13与pBR322的有关片段构建而成。