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1-100ng/ul(工作浓度)。浓度太低和太好都会影响扩增效率,但并不是绝对的。因为有一些基因表达水平极低,有一些在特殊情况下又极高。qPCR很多时候仅仅反映的是几个样品之间的趋势,而不是绝对值。你先把cdna进行梯度稀释,然后进行pcr,如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间,那么就是很不错的稀释梯度