1.细菌培养
所有标本均应作革兰染色和需氧培养，厌氧培养应置于特殊的培养基，孵育48～72小时，然后检查。可能初次培养后大于1周还得不到易感性资料。
2.标本涂片检查
在对标本作厌氧菌培养的同时进行涂片镜检，可早期把有厌氧菌生长的信息提供给临床，如普通需氧培养无细菌生长，但直接涂片见到大量细菌者，即可考虑为厌氧菌感染；如普通培养只有一种细菌生长但直接涂片可见两种或以上细菌者，可考虑患者为混合感染。
3.厌氧菌药敏试验
厌氧菌药敏试验应该是严格的，需经国家临床检验标准指导委员会确认，但若菌种是已知的，则药敏情况可预先推测，因此很多实验室不作常规的厌氧菌药敏试验。
4.细菌染色
若感染部位的脓液革兰染色显示出混合的多形性菌群，则可考虑厌氧菌感染。由于革兰染色很难发现拟杆菌，故必须仔细观察特征性的变化不一的丝状杆菌。若感染部位取材作革兰染色显示为混合菌群，而明显坏死的组织培养仅见α-溶血性链球菌或单一的需氧菌如大肠杆菌，或甚至无细菌生长，则应考虑到可能是标本的运送或培养的细菌学技术不当之故。
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