照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加pH6.5磷酸盐缓冲液溶解并稀释制成每1ml中约含青霉素Ⅴ1mg的溶液。对照品溶液取青霉素V对照品适量,精密称定,加pH6.5磷酸盐缓冲液溶解并定量稀释制成每1ml中约含青霉素V1mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以有关物质项下流动相A-流动相B(60:40)为流动相;检测波长为268nm,进样体积20lpH6.5磷酸盐缓冲液、系统适用性溶液与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C16H18N2O3S的含量。每1mg的C16H18N2O3S相当于1695青霉素V单位。
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