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叶绿素荧光参数出现负值的原因有以下几点。1、单光束分光光度计,电压、光源不稳定导致。2、双光束分光光度计:比色池差异,先都用空白做基线校正。3、在测定吸光值前为进行调零,或比色皿校正。4、空白被污染,参比溶液受到污染本身吸光值就比样本大,比如说比色皿不成套、未洗干净,每次用前校准一下。