(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml,置10ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度。测定法取效价测定酶活力项下的底物溶液2.9ml,在30℃±0.5℃预热5分钟,置1cm比色池中,精密加入供试品溶液0.1ml,混匀,立即计时,使比色池内的温度保持在30℃±0.5℃,在253nm的波长处测定,以上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)0.1ml代替供试品溶液,同法操作,作为空白对照准确读取4分钟时的吸光度(A4)和6分钟时的吸光度(A6)求得A值[(A6-A4)/2],按下式计算。AR0.0383a×b式中a为供试品溶液每1ml中的毫克数b为供试品每1mg的效价单位数。结果判定R值(水解速率)应为0.12~0.17。(2)在纯度项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
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