第二天就浑浊了,说明污染得很厉害啊.一般是真菌或者细菌,因为这两个繁殖比较快.其中细菌繁殖速度比真菌还要快.黑胶虫、支原体之类的出现都是培养比较长时间才出现的.至于是真菌还是细菌,肉眼看看有没长毛什么的.长毛了,一般就是真菌.你说显微镜下树枝状,那好像不太能判断出是真菌还是细菌.个人感觉细菌可能性较大.
复苏三批都这样的话很可能是分装冻存前就出问题了或者使用的培养基灭菌没灭好,不太可能是无菌操作不过关的吧.
污染了的细胞先不要倒掉.分成2份,一份就这么放着,看看之后会不会长毛之类的,好根据菌落形状判断是什么污染.另一份加点广谱抗生素看看能否有效（主要看菌的抑制有没效果,细胞的话不太可能挽回了）.如果有效,那么另外复苏一批,在复苏后使用的培养基中加抗生素.如果没效,那可能就是真菌污染了,比较棘手的情况.可以用两性霉素B试试.但污染严重的话,大多数情况是需要重新复苏一批或者买细胞了.
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