基本原则
质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作为确证方法。
在分析仪器上的进样顺序是:空白溶剂、阴性控制样品、要确证的样品、阳性控制样品再进样,最后是阴性控制样品。
色谱分离
1.保留时间
测试部分中分析物的保留时间(或相对保留时间),应在一个特定的保留时间窗口范围内与校正标准的保留时间相符。保留时间窗口与该色谱系统的分辨能力相当。分析物和内标的保留时间之比,应与校正溶液的相对保留时间一致,GC偏差为±0.5%,LC偏差为±2.5%。
2.关于保留时间的讨论
√ GBT16631-2008高效液相色谱法通则:同样条件下重复试验的保留数据的分散性,RSD≤3%;
√ JJG705-2002液相色谱仪检定规程:定性测量重复性(6次测量)RSD≤1.5%;
√ JJF(闽)1032-2010液相色谱-质谱联用仪校准规范:定性重复性RSD≤2%;
√ JY/T021-1996分析型气相色谱方法通则:整机重复性保留时间RSD≤5%;
√ GB/T22260-2008饲料中甲基睾丸酮的测定高效液相色谱串联质谱法:试样保留时间与标准品的相对偏差不大于15%;
√ GB/T22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定液相色谱质谱联用法:样品与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5%;
3.质谱检测
(1)全扫描scan
用记录全扫描质谱图进行质谱测定时,在标准品参考图谱中所有相对丰度>10%(分子离子、分子离子的特征加成物、特征碎片离子、同位素离子等)的特征离子都必须检测。
(2)选择离子监测SIM
用碎片离子色谱图进行质谱测定时,分子离子最好是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定要源于分子的同一部分,每个检测离子的信噪比应≥3:1
☞相对离子丰度最大容许误差
☞2002/657/EC规定
√要确证指令96/23/EC附录I-A组所列的物质,最少需要4个识别点,包括具有促合成作用和其他未允许的化合物,如二苯乙烯类化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、二羟基苯甲酸内酯如玉米赤霉醇、β-受体激动剂等。。。
√要确证指令96/23/EC附录I-B组所列的物质,最少需要3个识别点,包括:兽药和污染物,兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等;其他环境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等。。。
☞质量碎片类型和识别点的关系
√每个离子计算一次;
√EI-GC-MS、CI-GC-MS作为不同的技术计算;
√用不同反应得到的衍生物,可增加识别点数;
√包括:二级离子和多级离子;
√可最多结合三种不同的技术确定最小识别点数;
☞各种联用技术识别点数实例