实验方法原理 | 选用本方法可产生用于放射自显影的32P末端标记分子量标志物。放射自显影带的强度与片段长度无关,标记DNA可稳定数月之久。
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 在20 μl 反应体积中,用可产生5’突出端的限制性内切酶消化0.1~0.4 μg DNA。
2. 加入20 μl Ci所需的[α-32P]标记下dNTP(400~800 Ci/mmol)和1 μl 5 mmol/l 3dNTP混合液。
4. 75℃加热10 min 以终止反应。如果需要,从标记DNA中去除未掺入的前体dNTP。 |