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磷酸化位点分析实验——高分辨凝胶电泳分离磷酸肽

2019.3.28
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验材料

蛋白样品

仪器、耗材

质谱仪

实验步骤

在聚丙烯酰胺凝胶上用 2-DE 纯化磷酸肽是最近发表的制备技术，其结果与 2D-PP 结果相似。非变性凝胶等电聚焦结合碱性 40%PAGE 胶用于磷酸肽分离及比较分析。 32p 标记样品用放射自显影或磷储屏检测。用 Edman 测序方法鉴定蛋白质并确定磷酸化位点，但也许更适于用 MS 鉴定。同 HPLC 一样，但出于不同的原因，此方法也会丢失特异的磷酸肽。但是，因为凝胶电泳装置很普通，所以此方法对于缺乏 2D-PP 作图装置的人来说还是非常有吸引力的。


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