方案8 酵母提取物的制备实验
实验方法原理 | 由于酵母的经典遗传分析和分子遗传分析都已经研究得非常透彻,因而对于纯化重组动物蛋白来说,酵母是一个很有吸引力的表达体系。关于培养和收集酵母细胞的讨论,尤其是芽殖酵母,参见 Jazwinski(1990)。酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如 French 加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如 Zymolase) 等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如 <1ml, 使用微量离心管)和数升的体积(使用特制的DynoMill仪器)都是很有效的。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1.在微型离心机上离心 3 mm,以收集细胞。 |