| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 插入一张 NTA-SAM 芯片并使用 PBS 或者 HeBS 作为运转缓冲液。 2. 注入 10 μl 1 mmol/L 的氢氧化钠，然后注入 25 μl 水性的 1% Ni（II）SO4，随后再加入组氨酸标记的配体蛋白和 aI 预测靶蛋白。 3. 使用至少三种靶蛋白的不同浓度重复步骤 2 中的操作。 组氨酸标记的配体蛋白能够在 200 mml /L 咪唑的处理下脱离表面。另外，每个实验可用一个新鲜的流动室（每张芯片有 4 个流动室）。 4. 使用 BIA 评估软件 point-and-click，计算分离率和结合率常数。使用三个 IE 蛋白浓度所得的结合率和分离率的平均值计算平衡常数。 展开 |
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