实验方法原理 | 细胞被制成分散的悬液后,以低密度(2~5 个细胞/cm2)被接种到底物上,贴壁并能存活生长形成细胞小群(克隆)的细胞百分数值称接种存活率,用以表示细胞群的活力。由于检测接种存活率时是借观察克隆(通常为16~50 个细胞)形成情况,又因每个克隆都来自一个细胞,因此也称克隆形成率。细胞接种存活率与细胞活力成正比。 如细胞冻存复苏后接种再培养时,常测定细胞接种率(Seeding Efficiency),即接种后细胞贴壁数。 细胞接种率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,从而细胞接种率和细胞接种存活率不完全相同。接种存活率在意义上虽与克隆形成率相同,但隆形成率概念更明确。形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞,因此用克隆形成率一词表示细胞活力更为准确。
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 一、冻存技术不良或细胞生活力弱时可降低接种存活率
二、软琼脂培养
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注意事项 | 1. 确定克隆无绝对标准,一般情况下不能少于8 或10 个以上的细胞群才算作一个克隆;克隆检测宜用低倍镜,用解剖镜检查甚好。
4. 琼脂与细胞相混时,温度不宜超过40 ℃以免烫伤细胞。
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