实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 准备好一根DEAE-Affi-Gel Blue柱子。用5倍柱床体积的加样缓冲液平衡(7 ml 柱床体积/ml 抗血清或腹水)。此步骤及以下各步均在4℃下操作实施。
3. 用洗脱缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱结合的IgG组分,以10 ml 为一组分分部收集洗脱液,并贮存于4℃,直至合并各组分。
4. 每组分取30~50 μl,用10%SDS-PAGE在还原条件下检测组分中是否含有IgG,合并含有IgG的组分,在4℃下透析大于40 h,期间换2次缓冲液。
5. 用5倍柱床体积的加样缓冲液重新平衡DEAE-Affi-Gel Blue柱,加少许NaN3晶体, 贮存于4℃。 展 |