实验步骤 | 基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照:转 录 质 粒 载 体(含有临床生物检测标本相关的c D N A ) 胍盐溶液 50 U/ul RNasin 5 X 反转录酶缓冲液 0.5m g / m l olig (d T )16 l m g /m l 乙酰化的B S A 4d N T P 混合液 200U /ul M o - M u L V 反转录酶 1 〇 X 无 M g C l 2 P C R 扩增缓冲液 扩增引物: 20umol/l 5’端 和 3’ 端 目 的 细 胞 因 子 特 异 性 引 物(表 1 4 . 5 . 1 和表14. 5. 2) 5U /ul Taq D N A 聚合酶 矿物油 含 有 I ug /m l 溴化乙锭的 3 % 琼 脂 糖 胶(m /V ) (附录 1) D N A marker 13m m X I O O m m 组织研磨器 1.5m l 和 0.5m l 离心管,高压灭菌 65°C 和 39°C 水浴 注意 :当处理人血细胞或者传染物时,必须按照生物安全程序(前言)进行 |
---|