七、蛋白胨水(靛基质试验用)
成分:
蛋白胨(或胰蛋白胨)20g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。
靛基质试剂
柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml。
欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内,然后缓慢加入浓盐酸20 ml。试验方法:挑取小量培养物接种,在36士1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d。加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。
注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。
八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)
成分:
牛肉膏 3g
酵母浸膏 3g
蛋白胨 10g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.3g
氯化钠 5g
琼脂 12g
蒸馏水 1000 mL
制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固。
试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36士1℃培养1~2d,观察结果。产硫化氢者使培养基变为黑色。
注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基。
九、尿素琼脂
成分:
蛋白胨 1g
氯化钠5g葡萄糖1g
磷酸二氢钾 2g
4%酚红溶液 3 mL
琼脂 20g
蒸馏水 1000 mL
20%尿素溶液 100mL
制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶。121℃高压灭菌15min。冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用。
试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36士1℃培养24h,观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。
十、氰化钾(KCN)培养基
成分:
蛋白胨10g
氯化钠 5g
磷酸二氢钾 0.225g
磷酸氢二钠 5.64g
蒸馏水 1000 mL
0.5%氰化钾溶液 20 mL
pH 7.6
制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm*100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月。同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。
十一、营养琼脂
成分:
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化钠5g
琼脂15~20g
蒸馏水1000mL
制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
十二、营养肉汤
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
pH7.4
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL ,121℃高压灭菌15min。
十三、缓冲蛋白胨水(BP)
成分:
蛋白胨 10g
氯化钠 5g
磷酸氢二钠 9g
磷酸二氢钾 1.5g
蒸馏水1000mL
pH 7.2
制法:按上述成分配好