基本方案
实验材料 | RNA |
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试剂、试剂盒 | PBS 细胞裂解液 SDS 蛋白酶K 酚 氯仿 异戊醇 无水乙醇 |
仪器、耗材 | 离心机 培养箱 |
实验步骤 |
1. 对于单层培奍细胞
3. 重悬细胞于375 μl 冰冷的细胞裂解缓冲液,并置冰浴5 min。
5. 加入2.5 μl 20 mg/ml 蛋白酶K,37℃温育15 min。
6. 加入400 μl 酚/氯仿/异戊醇抽提,在旋涡混合器上振荡用微量离心机离心,上清移至干净的离心管中,重复抽提1遍。
9. 用微量离心机4℃离心15 min 加人1 ml 75%乙醇/25% 0.1 mol/l乙酸钠(pH5.2)冼涤沉淀。
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