化学合成siRNA分子实验
体外转录合成siRNA分子实验
采用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA分子
采用RNaseⅢ制备siRNA分子实验
实验方法原理 |
当确定了靶基因上的 siRNA 分子作用位点以后,根据靶位点的序列可以很方便地推导得到相应的 siRNA 分子的正义与反义 RNA
链序列。它们包含 19 bp 的互补双链区和两侧的不配对区(每侧为 2 个 U 成 2 个 T ),在合成时用 T 替代 U
可以降低成本并可以提高 siRNA 分子的稳定性,利用 DNA/RNA 合成仪首先分别合成长为 21 nt 的 siRNA
分子的正义链和反义链,然后在体外将它们退火形成双链 siRNA 分子。 |
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实验材料 | RNA 单链分子 |
试剂、试剂盒 | 退火缓冲液 核酸转染试剂 DEPC处理水 |
仪器、耗材 | NuSieve GTG 琼脂糖凝胶 |
实验步骤 |
一、材料与设备 展开 |