MTT法
实验方法原理 |
活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联免疫检测仪在490 nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。 |
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实验材料 | 细胞 |
试剂、试剂盒 | D-Hanks液 牛血清 RPMI1640 双抗 0.08%胰酶 |
仪器、耗材 | 净化工作台 离心机 恒温水浴箱 冰箱 倒置相差显微镜 培养箱 吸管 玻璃瓶 培养瓶 废液缸 吸头 枪头 胶塞 离心管 量加样枪 红血球计数板 |
实验步骤 |
一、接种细胞
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注意事项 |
1. 选择适当的细胞接种浓度。在进行MTT试验前,对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,然后确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间。
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