沙门氏菌属是一大群寄生于人类和动物肠道内,生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌,有的专对人类致病,有的只对动物致病,也有对人和动物都致病,这些统称为沙门氏菌。
沙门氏菌目前已经发现1800种以上,按抗原成分可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌型。其中与人类疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌,乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌,丁组的伤寒和肠炎杆菌。
此菌可引起禽伤寒、鸡白痢、猪霍乱、鼠伤寒沙门氏菌病、猪副伤寒、马流产沙门氏菌病等疾病。致病性最强的是猪霍乱沙门氏菌,其次是鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌。
感染沙门氏菌或食用被带菌者粪便污染的食品,可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。
原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;抑菌剂抑制革兰氏阳性菌,增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落,大肠菌群产生蓝绿色的菌落。
培养基配方(每升):
蛋白胨19.6g
酵母膏粉3g
氯化钠5g
抑菌剂1.5g
琼脂12g
混合色素6.4g
最终pH 7.0±0.2
使用方法:
1、称取本培养基47.5g,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,混合均匀加热至100℃,并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),不需高压灭菌,冷至50℃,倾注灭菌平皿。
2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。
3、建议使用二步增菌法:
(1)前增菌:将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中,混合均匀后37℃培养6~8h;
(2)选择性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中,混合均匀后37℃培养18~24h;
4、用接种环取增菌液一环,划线接种于沙门氏菌显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。
5、观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。
质量控制:
本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表。
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征
鼠伤寒沙门氏菌 CMCC50115 良好 菌落品红色
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 菌落蓝绿色
奇异变形杆菌 CMCC(B)49005 良好 菌落无色
粪肠球菌 ATCC29212 受抑制 ----
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:可配置1L的培养基干粉。