两种细菌计数方法

细菌标准计数方法:

标准的做法是将定量菌悬液（1ml、0.5或0.1ml）加到冷却至50-55度融化的琼脂培养基中（一般做细菌菌落计数用营养琼脂平板,而做真菌菌落计数用沙氏平板）中混合后置于孵箱观察.

细菌平板计数法:

首先我们分别在N个EP管内加入900微升无菌N.S或者缓冲液拟做稀释液,从标本中取出100微升加到第一个EP内,则第一EP管内细菌浓度为标本的1/10；同法,从第一EP中取出100微升加到第二个EP内,则第二EP管内细菌浓度为标本的1/100.依此类推,第N个管为原标本浓度的1 /10n,再取合适的梯度100微升铺皿.培养后,如平皿上菌落数为10-200就比较正确、容易计数,那你选择的浓度梯度就比较好,记数比较可靠！数记出来了,可以倒推出你标本的浓度.

如某标本未知浓度 其第三个梯度的计数为了18,则标本每毫升的细菌浓度=18×10（因为你铺皿只用了第三管1/10）×100×10

将一定量的菌液接种在平板表面这是一种简化的计数方法,两者区别在操作上一个麻烦,一个简单,在判断结果上接种平板表面的,菌量多时没有稀释好容易产生菌落融合在一起生长不易分离现象,致使读数困难和不准.混合在一起则菌细胞分布较均匀,结果易观察,当然,两种方法都要对配制好的菌液进行系列稀释,对不同稀释度的菌悬液进行菌落计数,然后乘以稀释倍数即可得实际菌细胞数量,一般以生长100-300个菌落平板的为佳.

注:平板计数更加快捷方便一些,而且,数菌的时候更加方便,如果用混匀计数......数菌的时候可以看得你眼花！通常,我们认为,细菌数量在30-300之间是较准确的,在300以上容易涂布不均使细菌混在一起,30以下稀释的时候误差太大.

经验:涂布的时候不要嫌累,多涂一会不会有什么坏处,否则,细菌涂布不均就.....