离子交换色谱仪分析中,离子交换剂不仅要与被分离物质进行交换,还要与缓冲液进行交换。
选择的起始缓冲液的pH值和离子强度能使样品中的有效成分与离子交换剂结合,而不能使样品中的杂质与离子交换剂结合,pH值一般比有效成分的pI值高一个单位或低一个单位,就能把有效成分和杂质分开。或者选择的起始缓冲液的pH值和离子强度能使样品中的杂质和离子交换剂结合牢固,有效成分和离子交换剂结合不牢。
缓冲液选择的关键是有效成分的等电点。对于一种分离的未知有效成分而言,其等电点须通过试验才能确定。
洗脱液的选择主要是使和离子交换剂结合的成分解离下来。洗脱液的离子强度比起始缓冲液高。