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纸层析分离是以滤纸为介质，滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂作为流动相。展开时，有机溶剂在滤纸上流动，样品中各物质在两相之间不断地进行分配，由于各物质的分配系数不同，移动速度不同，从而达到分离的目的。纸层析分离常与离心机分离技术结合使用。
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