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液相色谱仪测黄芪甲苷的含量

2020.1.21
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

黄芪具有清热除湿、益气化瘀、利尿祛脓、止痛促颗粒的作用,具有清热除湿、益气益实、促进排尿祛脓、促进肉芽的作用。黄芪含有皂苷、黄酮类化合物、多糖和氨基酸,其中黄芪甲肝是黄芪的主要活性成分,黄芪及其制剂的质量控制指标成分。

黄芪饮片中的黄芪甲苷含量的测定

黄绿铠装常用含量的测定方法为薄层扫描和高效液相色谱仪。薄层扫描法操作复杂,重现性差。传统的高效液相色谱仪(HPLC)紫外检测器不适用于黄、白装甲的检测,因为黄、白甲在200 nm左右吸收较小,检测灵敏度低,噪声大。蒸发光散射检测器(ELSD)对黄芪甲苷具有很高的灵敏度,在实验中得到了广泛的应用。

采用蒸发光散射高效液相色谱仪测定黄菊花汤片中黄绿甲基-1-1的含量。采用高效液相色谱仪、分析天平和超声波清洗机。

高效液相色谱仪条件:流动相:乙腈-水(体积比为32∶68),流速为1.0ML/min;柱温:35度;注射量:20升;喷雾温度:60度;漂移管温度:80℃。

黄芪片在50℃干燥至恒温。粉末在研钵中研磨,然后在380微米处筛出。取4g粉末,置于索氏提取器中,加入40毫升甲醇,浸泡过夜。第二天加入适量甲醇,加热回流4h,提取液恢复干燥。通过添加10毫升水和微热溶解残留物。用40毫升饱和正丁醇摇动残渣4次,然后与正丁醇溶液混合。用40 mL 1%NaOH溶液进行二次清洗,丢弃1%NaOH溶液,将正丁醇溶液蒸发至干燥状态。加入5毫升水溶解残留物并冷却。将残余物注入D101大孔吸附树脂柱。用50毫升水洗脱并丢弃。然后用30毫升40%乙醇洗脱并丢弃。然后用80毫升70%乙醇洗脱并丢弃。将残渣蒸发至干燥状态,用甲醇溶解后,转移到5 mL容量瓶中。残留物用甲醇固定在标线上,摇匀。过滤后用0.45。m.m滤光片,在仪器的工作条件下进行了测量。


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