1.样品前处理方法
称取10.0 g 样品于50 mL 烧杯中,加入20 mL 水溶液,稀释混匀,待净化。依次用3.0mL 的正已烷+乙酸乙酯(1+1),3.0mL 去离子水活化HLB 小柱,待净化的样品6.0mL 加至SPE 净化柱,萃取过程需要在负压条件下进行,最后用6.0mL 的去离子水洗涤提取容器,一并过柱,抽真空2 min,将小柱抽干;同时准备活化氨基-硫酸镁小柱,在LC- NH2氨基小柱中装入1/3 高度的无水硫酸镁,用5 mL 正已烷+乙酸乙酯(1+1)活化氨基-硫酸镁小柱,最后保持填料上剩余0.5 mL 正已烷+乙酸乙酯(1+1)活化溶液;由上而下将HLB 小柱(上)NH2 小柱(下)进行串联,用15 mL 正已烷+乙酸乙酯(1+1)分三次对串联小柱进行洗脱,并且洗脱开始时需要负压抽真空,以便洗脱进行,收集全部洗脱液于15 mL 玻璃刻度试管,置于40 ℃下氮吹干,用甲醇:水为5:95 溶解残渣,定容至1.0 mL,取上层清液供LC/MS/MS 分析。
2. LC-MS/MS 仪器条件
(1) 液相色谱参数:
色谱柱: Phenomenex Synergi Fusion-RP 2.0X50mm,4um
流动相:A:水(含5mM 甲酸铵) B:甲醇(含5mM 甲酸铵)
柱温:30℃,流速:250μl/min;
流动相:A:水(5mM 乙酸铵),B:甲醇(5mM 乙酸铵);
梯度洗脱,洗脱条件见表1:
(2) 质谱条件参数:
离子源:Turbo V™ 离子源;
扫描模式:正离子
采集模式:多反应监测MRM
以上质谱参数适用于AB SCIEX 公司API TripleQuad 3200/4000/4500/5000/5500/6500以及QTRAP 3200/4000/4500/5500/6500 型号仪器;
实验结果
多菌灵和甲霜灵总离子谱图如下:
结论
AB SCIEX 提供的全方位解决方案,可同时测定葡萄酒中多菌灵和甲霜灵。
参考文献
[1] Kaushik Banerjee, Dasharath P. Oulkar, Soma Dasgupta. Validation and uncertainty analysis
of a multi-residue method for pesticides in grapes using ethyl acetate extraction and liquid
chromatography–tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2007,1173:
98–109