100mg/ml 牛血清白蛋白(BSA)
BSA 0.1g
0.15 mol/L NaCl 1ml
溶解后-20℃保存。制作蛋白标准曲线时,用0.15 mol/L NaCl进行100倍稀释成1mg/ml,-20℃保存。
还原型 5XSDS 上样缓冲液
0.5 mol/L Tris·HCl (pH6.8) 2.5ml
二硫叔糖醇(DTT,MW154.5) 0.39g
SDS 0.5g
溴酚蓝 0.025g
甘油 2.5ml
混匀后,分装于 1.5ml 离心管中,4℃保存。
Tris (MW121.14) 3.03g
甘氨酸(MW75.07) 18.77g
SDS 1g
蒸馏水至 1000ml
溶解后室温保存,次溶液可重复使用 3~5 次。
(电泳液可以回收重复利用,一般将回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分,上半部分最好使用新鲜的电泳缓冲液)
(可以配制成 10×电泳缓冲液进行保存,稀释 10 倍使用)
半干
24mmol/L Tris (MW:121.14) 1.4536 g
192mmol/L 甘氨酸(MW:75.07) 7.20672 g
20 %甲醇 100 ml
蒸馏水至 500ml
浸渍(湿转)
48mmol/L Tris 2.375g
39mmol/L 甘氨酸 11.25g
20 %甲醇 200ml
0.0375%SDS 0.375g
蒸馏水至 1000 ml
溶解后室温保存,次溶液可重复使用 3~5 次(次溶液最好保存在 4 度冰箱,最多使用 5 次左右,不然影响转移效率)。(先用蒸馏水溶解甘氨酸、Tris 和 SDS,然后再加入甲醇,最后补足液体。如果先加入甲醇,溶解甘氨酸、Tris 和 SDS 等比较困难)
(可以配制成 2×转移缓冲液进行保存,稀释后使用)
10X 丽春红染液
丽春红 S 2g
三氯乙酸 30g
磺基水杨酸 30g
蒸馏水至 100ml
1 mol/L Tris·HCl (pH7.5) 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
(可以配制成 10×TBS 缓冲液进行保存,稀释 10 倍使用)
20 %Tween20 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用,最好现用现配。
封闭液
脱脂奶粉(国产) 5g
TBST 100ml
最好现用现配。
14.4 mol/L β-巯基乙醇 700μl(通风厨里加)
SDS 2g
0.5mol/L Tris·HCl (pH6.8) 12.5ml
超纯水至 100ml
配制时,在通风厨内进行。4℃保存。可重复使用 1 次。(可用可不用)