试剂盒组成
组分 |
50次 |
100次 |
吸附柱和收集管 |
各50个 |
各100个 |
裂解液 |
12 mL |
24 mL |
析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
洗涤液 |
9 mL |
18 mL |
洗脱液 |
3mL |
6 mL |
消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
说明书 |
1份 |
1份 |
产品介绍
BIOG RNA Swab Kit是常州百代生物科技有限公司研制的专门用于提取各种口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液样本中的RNA的试剂盒。BIOG RNA Swab Kit采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离RNA。提取得到的RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤
请自行准备:无水乙醇、生理盐水、1M NaOH、无RNA酶1.5mL离心管。
取出析出液和洗涤液,按以下操作:
a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇;9mL加入51mL无水乙醇。
b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇。
c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
样本处理:a) 拭子:向无RNA酶的1.5mL离心管中加入800μL生理盐水,将拭子收集的样本置于生理盐水中,涮洗20秒,使细胞完全脱落,贴离心管壁挤干拭子上的液体,12,000 rpm 离心5 min。
b) 痰液:向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH,室温放置30分钟,每10分钟振荡混匀一次,12,000 rpm离心5 min,弃上清,加入0.5mL生理盐水,混匀,12,000 rpm离心5 min。
弃700或400 μL上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒,加入200μL 裂解液和20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。
将吸附柱放入收集管内,将上述溶液吸入吸附柱内,静置2 min,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。
将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。
将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 min,离去残留的洗涤液。
取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-50 μL 洗脱液,静置3 min,12,000 rpm 4℃ 离心2 min,收集RNA溶液。
-70℃保存,或直接用于下一步实验。
注意事项:
1. 为防RNA酶污染,实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩,使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水 。
2. 析出液、洗涤液均含有刺激性化学物质,请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清
水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。
储存、运输和有效期
本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月,消化液请于-20℃存放,避免反复冻融。
质量控制
本产品经严格的质量检验证明,无生物污染
注意 :本产品仅用于科研