为何选用时间分辨荧光检测？

我们知道，以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受本底荧光的干扰影响，例如包括样本载体、血清成分、仪器激发光源的杂射光的干扰，使得灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定（timeresolvedfluorescenceimmunoassay，TR-FIA）是针对这缺点加以改进的一种新型检测技术。

时间分辨荧光免疫测定的基本原理是以镧系元素铕（Eu）螯合物作荧光标记物，利用这类荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地消除非特异性本底荧光的干扰。

我公司的HG-1000时间分辨免疫荧光分析仪用的就是该技术。

时间分辨荧光免疫测定使用的仪器:

时间分辨荧光免疫测定所用检测仪器为时间分辨荧光分析仪，与一般的荧光分光光度分析仪不同，主要采用脉冲光源，照射样品后即短暂熄灭，以电子设备控制延缓时间，待非特异本底荧光衰退后，再测定样品发出的长镧系荧光。检测灵敏度可达0.2～1ng/ml。

试剂上：除了将试剂抗原或试剂抗体用镧系元素铕（Eu）螯合物进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应，还利用了增强液使荧光信号增强，因为免疫反应完成后，生成的抗原－抗体－铕标记物复合物在弱碱性溶液中，经激发后所产生的荧光信号甚弱。在增强液中可至pH2～3，铕离子很容易解离出来，并与增强液中的β-二酮体生成带有强烈荧光的新的铕螯合物，大大有利于荧光测量。