表1 计算浓度和变异系数，以分析B/jiangsu/10/2005(图3)
SRID
血清以Cy3-染料标记。未标记的血清和Cy3-标记的血清（小于总血清量的0.5％；证实不会干扰沉淀)与熔化的琼脂糖混合，浇铸在模中，以形成凝胶中的孔。样品和参照抗原在加入凝胶孔之前，用1％的两性洗涤剂Zwittergent在-22处理30分钟。凝胶在-22 15-18个小时，随后干燥，并在Typhoon的450nm下扫尾。利用ImageQuant TL软件将样品的环状区与参照抗原比较，从而进行评估。仪器和软件皆来自通用电气医疗集团。
结果
图2分别显示了三个分析(B、H3N2和HlNl)的典型校准曲线。校准曲线的动态范围优化到0.5-10 ug/ml产生的回收率在98-102%。根据参照抗原的连续稀释(低至0 ug/ml)，所有三种亚型的检测极限预计低于0.5 ug/ml，定量极限约1ug/ml。图1显示了在重组HA表面上重复注射不同浓度（0.5-16 ug/ml)的B/Jiongsu/10/2005血清和抗原后的相对响应。计算出的浓度显示在表1。
曾提到响应会随时间而降低，这在最初10-20个循环中最大，之后随循环数增加而稳定。所有待测的参照抗原在个自的表面也检测到类似的结果，改变再生条件或者用去污剂预处理样品也不会对其产生影响(数据未显示)。为了增加分析的准确性，运行了三个校准曲线，样品浓度是由差值校准曲线来确定的，如第2部分所示。
图2 A/H3N2(A)、B(6)和A(H1N1)的校准曲线，相应血清中各种参照抗原的浓度范围在0.5-8 ug/ml。校准曲线是在初期、中期和后期运行的，析了约40个未知样品。
为了研究针对不同毒株的血清与表面上重组HA蛋白之间相互作用的特异性，在所有三个表面上分析了不同毒株的抗血清(图4)。血清在参照抗原(2 ug/ml)和无参照抗原下进行检测，以确认反应是相应病毒所特异的，以及病毒本身不会产生非特异的背景影响。结果表明固定在表面的三种重组HA蛋白分别是三类亚型A/H1N1、A/H3N2和B血清所特异的，而对于同亚型病毒内的毒株之间则是通用的。所有血清中只有一种能与所有表面结合(鸡/H1N1/PR/8/34血清，数据末显示)。其中的原因目前未知。可能是鸡来源的成分引起了非特异响应，而其它血清都来自绵羊。
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