1 概述
氯霉素ELISA免疫检测方法用于定量或定性检测受污染样品中氯霉素的含量。如果需要阳性样品可以通过HPLC, GC/MS其它的传统方法来验证。
2 安全性指导
试剂盒中的标准含有少量的氯霉素。底物中含有TMB。终止液中含有稀硫酸。避免终止液与皮肤和粘膜接触,如果不小心接触了请用大量的水冲洗。
3 储存和稳定性
氯霉素ELISA试剂盒应该保存在4–8°C。在使用前一定要回复到室温(20-25°C)。试剂盒在有效期内都可以使用。供应的抗体是低压冻干的(3管)。在做检测之前抗体需要用合适的稀释液稀释。每次稀释都要根据每次测量的样品数定,不要稀释的太多,因为稀释后在冰箱中仅能保存1周。
4 原理
原理是直接竞争酶联免疫检测方法。通过克氯霉素特异性抗体来识别氯霉素。样品中的氯霉素和氯霉素酶结合物竞争与鼠抗氯霉素抗体的结合位点结合。氯霉素抗体和包被在微孔板上的羊抗鼠二抗结合。经过一个洗涤步骤加入底物溶液,发生显色反应(产生蓝色)。蓝色的强度和样品中氯霉素的含量成反比。经过一个特定的时间显色反应被终止。用酶标仪测定。通过绘制标准曲线计算样品中氯霉素的含量。
5 试剂盒的限制和干扰因素
样品中经常出现的多种有机物和无机物已近作过检测对此试剂盒的检测结果并无干扰。由于化合物的易变质性由基质反应引起的干扰是不可能完全避免的。操作不当可能导致检测结果错误,比如:试剂盒保存条件不对、错误的加液顺序、试剂的量没有加准确、孵育的时间太长或太短、孵育的温度太高或太低(低于10°C,高于30°C)。Abraxis氯霉素ELISA试剂盒提供一个初步检测结果,和其它检测方法一样对阳性结果要求通过其它传统的方法来验证。
重要性
食物中抗生素对人类的健康有很大的威胁。由于氯霉素的成本低,而且是一种光谱抗生素,发现最早在发展中国家被应用。在发达国家氯霉素仅限制用于治疗眼病。因为氯霉素可以严重的损害骨髓,是致命性的。
口服氯霉素治疗适当的用于治疗MRSA或其它抗体耐药性感染。氯霉素普遍用做兽药治疗小哺乳动物和两栖动物。一种真菌疾病在过去的30年时青蛙的数量减少了三分之一。因为再生障碍性贫血、变态反应、促进抗药性的产生的作用,包括欧洲、美国、加拿大等很多国家都禁止在动物饲料中添加氯霉素。这些国家也颁布法令凡进口的食物都要检测氯霉素残留。确保人们的健康。氯霉素检测试剂盒在做一次重复的情况下可以检测40份样品。在2小时内可以检测完。
性能数据
敏感性:0.023 ng/mL
重复性:标准的变异系数(CVs) <10%,;样品的变异系数(CVs) <15%。
选择性:这个试剂盒可以检测氯霉素以及其他相关的化合物(检测程度不同)。