如图所示,培养基pH值随着碳酸氢钠量的增加,呈抛物线增长,当碳酸氢钠加到一定量时,pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加,呈直线增长,碳酸氢钠量越大,渗透压值越大。
如果为了达到工作pH值仅加入少量的碳酸氢钠,而忽略渗透压,一来可能会达不到缓冲效果而引起细胞培养过程中pH值变化较剧烈,二来会使培养基成为低渗溶液,在培养细胞时易造成细胞膨胀破裂;如果为了达到工作pH值而加入大量碳酸氢钠,一来可能会难以达到期望的pH值,二来会使培养基成为高渗溶液,在培养细胞时易造成细胞萎缩。
生产中最好通过实验找到合适渗透压和pH值情况下的碳酸氢钠加入量。下面是DMEM(HED)和MEM培养基的碳酸氢钠与pH值、渗透压的曲线。
DMEM(HED)培养基
MEM培养基