糖基化剖析的必要性及统计分析方法

　　糖基化剖析的必要性及统计分析方法

　　目前的分析方法

　　糖链常用的分析方法有：液相色谱法、毛细管电泳法和高效阴离子交换色谱法。但无论是液相色谱法还是毛细管电泳法，都必须使用专用试剂进行荧光衍生。此衍生耗时长（4小时）且会导致唾液酸丢失，不能准确分析含唾液酸样品。且也无法分析磷酸化糖及硫酸化糖。而离子色谱无需衍生，定量准确，可以覆盖分析所有糖类型。

　　对于单抗药物的复杂糖基化，离子色谱可以从三个方面给予解析：

　　1.糖链水准的剖析——N糖图普测量

　　Ｎ—糖基化体现的糖链能够根据肽甘酶Ｆ或肽甘酶Ａ酶切功效，或是肼解功效从糖蛋白上释放出。糖链经清洁后可立即进样，不用衍化，防止了衍化化全过程中唾液酸化聚糖的构造更改。

　　2.单糖构成测量

　　单抗糖链关键由葡萄糖胺、半乳糖胺、岩藻糖、果糖、半乳糖、甘露糖、唾液酸等单糖构成。单糖构成测量能够从基本水准上对单抗的糖构成差别得出分析。

　　3.唾液酸的测量

　　唾液酸存有于单抗的糖链尾端，针对单抗在植物体内作用的充分发挥起着非常关键的功效，危害药品的实效性。唾液酸的差别，是人源抗原和别的微生物抗原差别的1个指标值。唾液酸的释放出来，可应用柔和酸水解反应或酶解。应用离子色谱剖析矿酸的唾液酸试品，可立即进样，不用衍化。不一样构造的唾液酸在CarboPac PA10色谱柱上能够获得迅速高效率的分离出来。

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