注意事项 | 1. 赖氏比色测定由于受底物a-酮戊二酸浓度和2,4二硝基苯肼浓度的不足以反应产物丙酮酸的反馈抑制等因素的影响,标准曲线不能在延长至200卡门单位。
2. 血清中ALT在室温(25℃)可以保存2天,在4℃冰箱可保存一周,在25℃以下可保存一个月。
3. 严重脂血,黄疸或溶血血清可能会引起测定管吸光度增高,因此,检测此类标本时,应做血清标本对照。
4. 当血清标本酶活力超过150卡门单位时,应将血清用生理盐水稀释5倍或10倍后再进行测定。
5. 加人2,4-二硝基苯肼溶液后,应充分混匀,使反应完全,加入氢氧化钠溶液的速度要一致,不同的加入速度会导致吸光度读数的差异。
6. 底物中的a-酮戊二酸和2,4-二硝基苯肼均为显色物质,称量必须很准确,每批试剂的空白管吸光度上下波动范围不应超过0.015A如超过此范围,应检查试剂及仪器方面问题。
7.
成批ALT测定时各管加入血清后,试管架应置37℃水浴中操作,以一定的时间间隔各管加人底物缓冲液,每管即时混匀,以加人第一管开始计时,准确每反应30min。立即依相同的时间间隔,依次向各管加人2,4二硝基本肼亦每管即时混合,这样,才能保证成批ATL测定的准确性。 |
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