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精液显微镜检查实验

2020.8.10
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

精浴液化后,取混匀的精液标本1滴于洁净的载片上加盖玻片后,先以低倍镜观察有无精子,以及精子是否活动.若不见精子,将标本离心,沉渣中有无精子,若两片全无精子,应报告无精子,勿须作其它试验。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

 实验方法原理 一、精子活动率检查


用低倍镜观察有无精子的湿片,随即转为高倍镜,至少观察100个精子中,有尾部运动的精子所占的百分率即为活动率,计算公式为:


精子活动率%=(活动精子数/活动精子数十不活动精子数)× 100


二、精子活动力检查:


检查精子活动率的同时,将活动力按下列标准分级


0级          不活动          死精子

Ⅰ级           活动不良               精子动作迟钝原地转动

Ⅱ级          活动较好         精子活动,但方向不定

Ⅲ级          活动良好         精子呈有线活泼运动

正常精液             于排精后1小时Ⅱ级精子60%


三、精于形态学检查


1、精子密度>15×109/L的精液;可将液化精液直接涂片,<15×109/L的精液先要液化精液1500r/min离心10分钟,取沉淀物涂片。


2、将涂片空气中自然干燥,甲醛固定5分钟,用HE染色,3、待染片干燥后,在油镜下计数200个精子,报告正常异常出现率。2形态观察正常精子有头部,中间段与足部,HE染色头呈紫色,尾部呈白色或紫色。


四、精子密度与精子总数检查


1. 粗略估计法:将液化精液混匀后直接涂片,加盖玻片后在高倍镜下(40×)观察5个视野,取其平均数×109,即每升大概的精子数


精子读数


一、实验原理:用NaHCO3破坏精液的粘稠性,以甲醛固定精子,将精液定量稀释后进行计数。

实验材料 精液稀释液

试剂、试剂盒 NaHCO3浓甲醛液蒸馏水

实验步骤

实验试剂:精液稀释液 NaHCO3 5g浓甲醛液1ml,蒸馏水加至100ml.


实验操作:


1. 取稀释液0.38ml于小试管中。


2. 用血红Pr吸取己液化混匀的精液20微升,加至稀释液内,稀释20倍。


3. 将稀释液混匀后.充入细胞计数室内.


4. 静置5分钟,让所有精子沉积下来,然后用高倍镜计数,中央大方格内四角和正中央共5个中方格内的精子数,计数以头部为主.


实验计算:精子数/L=5个中方格内精子数×109


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