实验材料 DNA
试剂、试剂盒 限制酶缓冲液
仪器、耗材 电泳仪
实验步骤
用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。
2. 从每个反应取小份样品作电泳分析，用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。
3. 比较分子量标准估算出DNA片段的长度，推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。
4. 从1的每个样品管中取少许置另外的管中，用第二种内切酶消化，电泳分析比较酶切结果。
（1）两种酶切割。
（2）第一种酶单独切割。
（3）第二种酶单独切割。
5. 估算DNA片段的长度，重复此步骤，直到明确一致而且相互不矛盾的限制性内切酶位点被推导出来，DNA图谱便告完成。
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