实验方法原理
D-6-磷酸葡萄糖:NADP 氧化还原酶,G6P-DH,Zwischenferment (O.Warburg)。
6-磷酸葡萄糖 + NADP+ → 6-磷酸葡萄糖酸盐 + NADPH + H+
实验材料 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶溶液
试剂、试剂盒 三乙醇胺-NaOHD-6-磷酸葡萄糖 NADP
仪器、耗材 分光光度计
实验步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 酶溶液
25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。
注意事项
其他
试剂:
0.1 mol/l 三乙醇胺-NaOH,pH 7.6(三乙醇胺-HCl,Mr=185.7;18.6 g 用 1 mol/l NaOH 调节)
0.1 mol/l D-6-磷酸葡萄糖(钠盐,Mr=282.1;282 mg 溶于10 ml 水中)
0.04 mol/l NADP(二钠盐,Mr=787.4,315 mg 溶于 10 ml 水中)