水是生命之源,是我们赖以生存的物质资源之一。
在实验室中也不例外,水作为不可或缺的物质之一,往往会对实验结果产生关键影响。
用来评价水质的常用指标有电阻率、总有机碳、内毒素、微生物等。
微生物作为水中主要的污染物之一,在实验中影响复杂,很难控制,容易被忽视。
今天,Q博士就来给大家讲讲如何降低水中的微生物含量。
1.什么是微生物?
微生物包括真菌、细菌、病毒以及一些小型的原生生物。
给大家举几个例子吧。
微生物举例 直径
酵母 50 µm – 4 µm
细菌 5 µm – 0.3µm
病毒 0.3µm – 0.01 µm
2. 微生物及生物膜会引起哪些问题?
① 纯水中的微生物会污染分析系统。
②系统中的温度环境会促进细菌生长。
③ 一旦形成顽固的生物膜,很难清除干净。
④ 微生物及代谢物会产生各种离子和酶,其带来的各种干扰和影响无法控制。
⑤生物膜活性及迁徙能力会导致持续污染。
3. 各类标准和法规对微生物有哪些要求?
①分析实验类标准
GB/T6682-2008 | GB/T 33087-2016 | ASTM D1193-06 | |
微生物指标 | NA | <10cfu/l | NA |
内毒素和热源 | NA | NA | <0.25EU/ml |
②制药类纯化水标准
中国药典 | EP | USP | |
微生物指标 | <100cfu/ml | <100cfu/ml | <100cfu/ml |
内毒素和热源 | NA | <0.25EU/ml | NA |
③临床类纯化水标准
CLSI | WS/T 574-2018 | |||||
参数 | CLRW 标准值 | SRW标准值 | IFW | 试剂用纯化水 | 特殊试剂用纯化水 | |
Siemens (Advia) |
Roche (Cobas) |
|||||
细菌 | < 10 cfu/mL | < 10 cfu/mL | < 10 cfu/mL | < 10 cfu/mL | < 10 cfu/mL | < 10 cfu/mL |
4. 降低微生物含量的方法有哪些?
这里Q博士为大家介绍一下膜过滤法。
跟Q博士一起来做实验吧!
实验1:水在不同平板上(R2A&TSA)孵育细菌。
通过实验可以发现,R2A更适合培养在纯水甚至超纯水中的细菌。
实验结论:纯水中细菌培养用培养基推荐 (R2A vs TSA) R2A。
实验2:水被不同光线(Elix & Elix UV)照射。水在不同Elix系统中的微生物变化。
)经过两种不同处理,不同水箱条件对微生物会产生哪些影响?
实验结论:推荐使用紫外照射Elix UV+ ASM tank对水进行处理。
思考题:Milli-Q系统中如何抑制用水中微生物的生长?
Milli-Q对微生物的纯化方法。
过滤膜 (0.2 µm screen filters, ultrafilters)
紫外照射 (254/265 nm)
Milli-Q将过滤膜和紫外照射融合在一条完整的纯化链中,以达到对微生物的有效控制。
两种方法的“联手”可以有效控制水中微生物的生长,提供符合实验室要求的纯化水。