新冠病毒研究用水系列：如何获得完美的核酸电泳条带

在新冠病毒2019-nCoV的分子生物学研究中，电泳技术是一个重要的方法，主要用于核酸、蛋白质的分离与鉴定，使用的实验仪器主要是电泳仪。本文，乐枫纯水为大家总结了实验中常出现的问题和解决方法。
 

什么是核酸电泳？
核酸电泳是基因操作的核心技术之一，用于分离、鉴定DNA、RNA 分子混合物和纯化DNA片段。
核酸电泳最让大家头疼的问题 - 异常条带
核酸电泳实验中，常常会遇到条带模糊、拖尾、扭曲等现象，究其原因，除了操作不当，电泳条件未优化，电泳缓冲液也是重要的影响因素之一。电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。

• 缓冲液离子强度低，电导率小，导致DNA迁移缓慢；如果多次使用，离子强度降低，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。

• 缓冲液离子强度高，则电导率高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。

表1 核酸电泳条带异常原因汇总及建议的解决方法

核酸电泳用纯水要求
为了防止水中杂质（如：核酸酶、蛋白质、离子等）对电泳结果的影响，核酸电泳实验配置缓冲溶液或稀释样品需要使用超纯水：

• 电阻率 18.2 MΩ·cm

• TOC < 10 ppb

• 无核酸酶和蛋白酶

• 细菌总数< 1 CFU/mL

• 热原< 0.005 EU/mL

• 0.22μm 或更低的颗粒过滤

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