小伙伴们遇到过这种情况吗?
当您的课题进行到白热化程度时
却发现细胞被污染了
此时大家的心情可谓五味杂陈
形容一下就是
问君能有几多愁,眼泪恰似一江春水向东流
不过,别担心
逍鹏生物炼就火眼金睛
帮助大家识破各种污染,拯救您的细胞
我们先来看看污染的真面目,总结下来无非以下几种类型:
我们一起来分析它们的特征:
1真菌-深藏不露
真菌之所以深藏不露,是因为它们一般不会导致培养基变浑浊,所以在污染早期,很难发现它们的踪迹。直到长到一定规模后在镜下可观察到分叉细丝状的菌丝(有些呈管状,树枝状,串珠状的菌丝)(如图1,图2)。这类污染中,为首的污染代表是酵母菌:显微镜下常见成串的珠状物,形态呈卵形,大约比细胞小5~10倍,当其进行出芽生殖时,会聚集成连体结构;爆发污染严重时,会造成培养基pH值改变,不易除去。
图1. 真菌污染 图2. 真菌污染
逍鹏生物可提供以下解决方案:
表1.产品列表
产品名称-中文名称 |
货号 |
作用种类 |
两性霉素B,250mg/ml |
真菌,酵母菌和霉菌 |
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两性霉素B,2500mg/ml |
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制真霉素,10000units/ml |
真菌,酵母菌和霉菌 |
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青链双抗(青霉素-链霉素) |
对革兰氏阳性菌G+,革兰氏阴毒性G- |
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青链双抗(青霉素-链霉素)10X浓缩 |
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青链霉素,制真菌素三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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青链霉素,两性霉素B三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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青链霉素,新霉素三抗 |
真菌、酵母菌和霉菌、G+、G- |
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硫酸庆大霉素溶液,50mg/ml |
对革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,支原体 |
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卡那霉素溶液,10mg/ml |
对革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,支原体 |
细菌-屡见不鲜
细菌种类繁多,分布广泛,是最容易污染细胞的微生物。
细菌在显微镜下呈黑色细沙状(如图3),典型特征是,可以使培养基在短时间内变成黄色或白色浑浊。细胞形态会出现多角,多核状况;贴壁细胞不附着,停止生长甚至死亡。
图3. 细菌污染
逍鹏生物可提供以下解决方案如上表1:
3支原体-无孔不入
支原体之所以无孔不入是因为它们种类繁多,常以寄生或腐生营养方式生长,广泛存在于环境之中。
支原体是细胞培养过程中的常见污染,经常来源于实验人员(支原体常见于人体皮肤、呼吸道、生殖道和消化道)、动物源血清及胰酶、消毒不完全的器具。其大小只有0.15~0.3μm,所以能通过一般标准的细胞培养过滤方法,0.22μm过滤膜。其污染特征不是很明显,增长速度相较于细菌比较缓慢,污染初期(轻微)培养基可能依然清澈不会变黄,所以轻微污染时不容易用常规方法(细胞外观观察或是DNA染色法)确认。
支原体会缓慢改变细胞形态、增殖、基因表达、蛋白合成及代谢反应,它携带的DNA/RNA与蛋白更可能造成QPCR、Western Blot或外泌体实验结果偏差。
如下图所示:
图4. 支原体污染