1. 电极拉制(SUTTER P97)
Ø 如何做Ramp test;
Ø 多步拉制参数调节,如何精确的拉制出各种理想口径的电极(教你玩转拉制仪;
Ø 拉制仪简单问题处理;
Ø 玻璃电极的拉制与抛光处理;(每人100根电极,让你拉到手软)
2. 溶液配制
Ø 内外液要求及注意事项;
Ø 如何调整你的内外液,以满足实验要求;(不拘泥于文献)
Ø 内外液配方中的小窍门,让你封接效率大大提高;
Ø PH计的使用;
Ø 露点式渗透压仪的使用;
Ø 若没有渗透压仪,渗透压的估算方法;
Ø 自己动手配制溶液(1L-2L),手把手的教你全过程;
3. 细胞培养
Ø 稳转细胞系的复苏、传代、铺片;
Ø 不同细胞系的差别;
Ø 因基础不同,想细胞操作的可以每天为大家准备细胞爬片;
4. 离子通道基础理论
Ø 深入讲解离子通道门控特性(电压门控、配体门控、机械门控);
Ø 吃透最难理解的激活、失活、去活、复活、敏化、脱敏,逐一对照实验实例告诉你电流为何如此变化;(会反复讲、反复用)
Ø 离子通道的其他基础知识;
5. 膜片钳电学理论
Ø 膜片钳是如何工作的;
Ø 膜片钳中重要的电容、电流、电压、电阻;
Ø 膜片钳中的实验误差与补偿(技巧性与经验性的干货很多);
Ø 膜片钳电学中的理论计算;(会反复的算,算到你脑仁疼)
6. 膜片钳实际操作(重中之重)
Ø 显微镜使用,如何理解焦平面让你快速找细胞与电极;
Ø 电动微操使用;
Ø 手动微操使用,ALA灌流,蠕动泵调节,教你如何进行精确的细胞旁给药;
Ø pCLAMP使用;
Ø 700A/B Commander使用;
Ø Protocol编辑(如何编辑各种各样的Protocol,激活、失活、复活、频率依赖,统统推倒);
Ø 膜片钳实验中实验记录标准,你再也不会找不到数据;
Ø Nav1.5/Nav1.7通道的记录(激活、失活、复活、给阳性药等),做到最漂亮的Nav激活电流,你已经成功一半了;
Ø hERG通道的记录(激活、失活、给药等),你能理解hERG通道的门控特性吗?搞懂它!!
Ø 在操作中遇到问题马上讲解,分析问题,解决问题,在我们培训班中就喜欢问题;
Ø 反复跟理论知识相呼应;
7. 数据分析与数据处理(重中之重)
Ø 教你如何在线实时分析;
Ø Clampfit处理数据(最大值、最小值、激活、失活、原始图、Waveform)标准化数据处理,十年后你依然知道数据是如何来的;
Ø Origin作图(绝对强大,你可以专门为Origin学习而来,绝对不让你失望);
Ø AI软件修图,做出跟文献中一样漂亮的图;
Ø 你所得到的所有数据都要分析的,手把手教你做出漂亮的figure.
8. 论文分析
Ø 共同探讨一篇电生理文章
Ø 编写文章中所有Protocol;
9. Patchmaster讲解及数据处理(因学员仪器而定)
10. Axon 200B 使用(因学员仪器而定)
11. 答疑