微分干涉相衬法:
为了克服相差法观察时样品细节像周围伴随有光晕,会掩没掉本来应该看见的细节,以及样品或组织切片厚度要求相当薄,原则上下能厚于10?m等局限性,利用双光束干涉的原理设计子微分干涉相衬法。
调整方法:
a. 必须在库勒明系统已调好的基础上才能调好DIC方法
b. 先用10×物镜,以明视野先确定好能把样品看清晰的物镜调焦位置
c. 把起偏器(polarizer)摆入照明光路中,注意其取向应为东—西方向
d. 把聚光镜转盘转到与10×物镜对应使用的位置上,即DIC 0.3—0.4
e. 在物镜后方或物镜转换器上插入10×物镜使用的DIC插片(DIC slider)
f. 把检偏器(analyser)插入成像光路中,注意其取向应为南—北方
g. 换上待观察的透明样品,开亮光源把样品调焦清晰
h. 调节DIC插片,使微分干涉相衬的像达到最佳效果,也就是浮雕效果最为明显
i. 同时可调节聚光镜的孔径光阑,使反差的效果也达到最佳
j. 然后再细微调样品的细节,可见样品中不同层面上的结构
k. 如果把补色器(first order red retardation plate)插入,并同时调节DIC插片,可在视野中看到不断变化的绚丽色彩,红、橙、黄、绿、蓝、紫、粉红、粉紫及金黄色都具有。适用范围:透明或不能染色的组织切片,厚度可达100?m左右,培养中的活组织和活细胞、小生生物等。