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不固定直接染色,细胞就会变圆,因为染色液的渗透压和细胞质不一样可以选择用CFSE染色后,铺板。过夜,等细胞重新贴壁后,再用PI染色,你应该是要看双染的效果,这个比较合适。用荧光显微镜观察的时候可以先观测拍照再固定,避免甲醇影响了细胞状态让它贴的不牢,或者不固定直接拍照,PI染色效果一个小时影响不大。