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我听说过的最小反应体系是10微升,主要有两个因素限制过小的反应液量:一是小液量的移液精度.楼主应该看看自己的移液枪是否有优异之处,能否精确添加你所需的移液量.二是PCR加热过程中的蒸发作用,会导致你的反应体系剧烈失水.在较大液量情况下,靠加热PCR仪顶盖,避免蒸发水凝集到反应管上部即可.但小液量一般还需要在液面上添加一层矿物油,防止蒸发.如果楼主确定以上两点得到妥善处理,从PCR原理上来说,比10微升更小的反应体系也是可能的.