在反相液相色谱中,流动相的pH值通常应控制在2-8的范围内。这个范围主要考虑到以下几个方面:
硅胶基质的稳定性:反相色谱柱通常使用硅胶作为基质,而硅胶在高pH值下容易溶解,导致柱寿命缩短。因此,为了避免这种情况,pH值一般不超过8。
样品的稳定性:许多生物样品和有机化合物在过酸或过碱的条件下可能会降解。选择中性附近的pH值有助于保持样品的稳定性。
检测兼容性:某些检测器,如紫外检测器,对pH值敏感。控制pH值在适宜范围内可以提高检测的准确性和灵敏度。
分离效率:调整pH值可以改变样品分子的离子状态,从而影响其在固定相和流动相之间的分配系数,进而改善分离效果。
柱子的选择性:不同的pH值可以改变色谱柱的选择性,使得某些难以分离的物质对能够实现更好的分离。
缓冲盐的选择:在选择流动相的pH值时,还需要考虑所使用的缓冲盐的pKa值,确保缓冲盐在所选pH值下有效。
仪器材料兼容性:过高或过低的pH值可能对HPLC系统中的某些组件(如泵和管路)造成腐蚀。
不同流动相的ph: