反相色谱的样品保留的介绍

　　反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定,保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大．对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《氰基<C1(TMS)<C3<C4<苯基<C8≈C18(强)。溶质保留值与固定相表面积成正比,普通载体(80 A°)的比表面积约为250 m2/g,而300A°孔径载体的比表面积约为60 m2/g。当其他条件相同时,溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60：250),小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整,溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中,采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。固定相的不同也可以导致选择性发生变化,氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异,一般应优先考虑C8柱、C18柱,然后是氰基柱,再次是苯基柱。

　　据统计,近80%的有机物及无机物可以用高效液相色谱法进行分离．其中反相色谱中的C18柱是高效液相色谱中最为常用的一类色谱柱。