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你怎么保存的?用的时候不能用酸性碱性过强的流动相,用完后一定要用有机相和水相梯度冲洗几遍(可能的话直接冲过夜),尤其是你用的流动相有酸、碱、缓冲液、盐等东西的时候一定要换成蒸馏水好好冲洗。另外最后保存的时候一定要把柱子里灌满有机溶解(甲醇或乙腈),冲至平衡,一定不能留水在里面(尤其是酸性的水液)。20个柱体积不够,你是不是用酸碱盐了?你最好用甲醇(乙腈)-水 梯度100%-10% (每次梯度至少20min)反复洗涤,另外用乙腈保存比甲醇好。