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苏氨酸蛋白酶使用其N端苏氨酸的仲醇作为亲核试剂进行催化。苏氨酸必须是N末端,因为相同残基的末端胺通过极化有序水而起到一般碱的作用,从而使醇去质子化以增加其作为亲核试剂的反应性。
催化分两步进行:
首先亲核试剂攻击底物形成共价酰基酶中间体,释放xxx个产物。
其次,中间体被水水解以再生游离酶并释放第二产物。
在鸟氨酸酰基转移酶中,底物鸟氨酸(受体)代替水进行第二次亲核攻击,因此与酰基一起离开。